仪器问题

  1. 游客65459309

    分子杂交仪的原理是什么?

    分子杂交仪的原理是什么?

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  1. 仪器达人

    核酸分子杂交技术根据碱基互补配对原则,在一定条件下用标记的已知DNA或RNA片段(探针)来检测样本中是否有待测的核酸序列。

    生理条件下DNA呈稳定的双链螺旋结构,在体外,当有变性因素存在时(如温度超过65℃、含胺或极端pH时),DNA分子内部的氢键断裂,解离成两条单链DNA,这种现象称为变性。在除去变性因素后,单链DNA能通过碱基互补再结合成稳定的双链螺旋结构,此过程称为复性或退火。

    在复性过程中,若存有与样本核酸某部分序列相同或高度同源的外源性单链DNA片段或寡核苷酸(一般为17~45个碱基)时,两者可通过互补碱基形成杂交体,即双链DNA分子,这一过程称为杂交。用一段已知的DNA片段加入复性的DNA中,若能够结合成双链分子,说明样本中含有已知的DNA序列。

    核酸分子杂交不仅发生在DNA与DNA之间,也可发生在RNA与RNA、RNA与DNA之间。生成的杂交体分别为 DNA-DNA、 RNA-RNA或 RNA-DNA的双链结构。


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